第二代测序技术NGS将遗传学研究推上了新的台阶，其无与伦比的高通量，使多种应用得以实现。要完全享受这一技术带来的便利，我们就需要制备与测序平台相匹配的样品。为此人们开发了许多工具，如今，将原始DNA转化为NGS文库，已经变得越来越容易。

    文库制备试剂盒

    制备NGS文库需要先提取DNA样本，利用超声或酶将其片段化，通过琼脂糖凝胶或磁珠选择合适大小的DNA片段，对DNA片段末端进行修剪，并在3’端加上与测序仪相配的接头。这些接头还可以作为“条码”，实现多重应用。如今市面上有许多NGS文库制备试剂盒，能使上述工作变得更加简便。

    尽管NEB公司并不生产二代测序仪，不过该公司开发了多种NGS样品制备工具，测序平台的NEBNext?系列产品。据NEB负责二代测序产品的Fiona Stewart介绍，NEBNext Ultra? DNA（或RNA）prep试剂盒不仅适用于低量样本，还能够处理福尔马林固定、石蜡包埋的组织FFPE。“人们越来越希望测序像FFPE这样富有挑战性的样本，我们针对这些困难样本，开发了可靠的制备方案，以帮助研究者们获得高质量的文库”Stewart说。

    Illumina公司为NGS样品制备提供了两种选择，TruSeq试剂盒和Nextera试剂盒。TruSeq试剂盒能够帮助人们获得高质量的数据，达到理想的覆盖度。“TruSeq试剂盒能够为人们提供准确且可重复的结果，”Illumina的市场经理Daniel Peiffer说。TruSeq试剂盒中的接头支持多重应用，试剂盒还提供了筛选DNA片段的磁珠。近来这一产品线迎来了新成员：TruSeq DNA PCR-Free试剂盒和TruSeq Nano DNA试剂盒。

    TruSeq试剂盒制备文库需要五到六个小时，而Nextera试剂盒的工作流程更为快捷，能够在90分钟以内生成完整的文库。Nextera试剂盒以一种转座酶为基础，能同时完成DNA的片段化和接头的添加，这一方案也被称为“tagmentation”。如果你需要快速完成大量样本的测序，那么Nextera试剂盒就是个不错的选择。Illumina公司也为RNA研究提供了相应的TruSeq试剂盒。在这种试剂盒的帮助下，研究者们不仅可以进行整个转录组的研究，还可以同时检测12至2,000个靶向基因的表达.