下列说明适用于大多数细胞类型。细胞消化的步骤和要点要根据经验和各种细胞类型的特点判断。通过细胞传代，定期观察细胞活力以判定最佳消化条件和操作流程。

    操作流程：   

    1、将胰蛋白酶溶液预热到37°C（或需要的其他温度，见步骤四）

    2、从培养皿中吸除残留的培养基。

    3、用适量平衡盐溶液或胰蛋白酶溶液小心地洗细胞层，并将洗液吸出。（必须去除所有血清，因为血清含有胰蛋白酶抑制剂。）单层细胞可以用无钙镁离子的平衡盐溶液；使用特定细胞系进行效果测试可帮助您确定使用哪种洗液更合适；对于敏感细胞，用经过平衡的盐溶液进行洗涤，这是避免细胞损伤的最佳方法。

    4、向细胞培养容器壁上添加胰蛋白酶溶液，并轻轻回旋转动培养容器使之覆盖细胞层。细胞温育数分钟并查看是否消化；细胞浆逐渐变圆并变得松散。对于特别难消化的单层细胞，将培养皿置于37°C的保温箱中较短一段时间。对于对胰蛋白酶敏感的细胞，可以使用2度到8度的胰蛋白酶进行消化，可以降低酶活性。细胞消化所需的时间取决于细胞类型、单层细胞的年龄和其他因素。通常会在5到-15分钟内完成细胞消化。

    5、细胞脱离培养容器壁后，添加适量的完全生长培养基（含有血清）。

    6、对于无血清条件，添加胰蛋白酶抑制剂缓和胰蛋白酶的作用。用移液器轻轻吹打，使细胞分散到悬液中；若吹打过猛，可能会损伤细胞。如果很难在不破坏细胞的情况下将细胞解离，可能需要使用消化功能更强的细胞消化液。