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低氧诱导因子1基因:黑色素瘤的“干扰者”
时间:2016-05-04 13:23:12  作者:生物360  来源:生物360
黑色素瘤是一种世界性疾病,每年约有10多万人被确诊。在过去黑色素瘤并不太常见,现在却越来越多了。这不是因为发病率高了,而是因为过去人们对黑色素瘤不够重视也不了解,检查手段也没有现在这么先进。

  黑色素瘤是一种世界性疾病,每年约有10多万人被确诊。在过去黑色素瘤并不太常见,现在却越来越多了。这不是因为发病率高了,而是因为过去人们对黑色素瘤不够重视也不了解,检查手段也没有现在这么先进。


  近期,中国山东省青岛市市立医院研究人员发表论文,旨在以小干扰RNA沉默人眼脉络膜黑色素瘤细胞中的低氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)基因,在缺氧状态下观察其对人眼脉络膜黑色素瘤(human uveal melanoma cell,OCM-1)细胞中基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)基因表达的影响。研究指出,缺氧条件下可以提高人眼脉络膜黑色素瘤细胞中HIF-1α蛋白的表达,而且HIF-1α蛋白的表达水平可以影响MMP-2的转录与翻译,从而可能进一步影响人眼脉络膜瘤细胞的外周浸润和远处转移能力。该文发表在2015年第06期《国际眼科杂志》上。

  将脉络膜黑色素瘤细胞分为正常组与缺氧组,其中将缺氧组再分成单纯缺氧组、干扰组、脂质体对照组、阳性对照组和阴性对照组;对正常组细胞用含有浓度为10%的胎牛血清和1%的双抗(青-链霉素混合液)的DMEM高糖培养基进行培养。在缺氧组人眼OCM-1细胞的培养瓶中加入100μmol/L CoC l2以构建肿瘤细胞内部的缺氧微环境。干扰组转染HIF-1αsiRNA,阴性对照组转染无义siRNA,阳性对照组转染β-actin siRNA,脂质体对照组转染空脂质体。RT-PCR检测细胞中HIF-1α和MMP-2 mRNA的表达,行Western-blot检测HIF-1α和MMP-2蛋白的表达。

  与正常组相比,单纯缺氧组HIF-1α蛋白的表达增高(P<0.05),而其mRNA表达量无明显变化(P>0.05);MMP-2 mRNA及蛋白的表达升高(P<0.05)。缺氧培养的各组之间相比,阳性对照组β-actin mRNA表达下降(P<0.05),证实转染成功;干扰组HIF-1αmRNA和MMP-2mRNA和蛋白表达均下降(P<0.05),阴性对照组、脂质体对照组各检测因素均无明显差别(P>0.05)。

关键字:诱导因子、黑色素瘤
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