1、采集
脐血采集方法有四种：半封闭式、封闭式、开放式及导管式。一次性无菌封闭采血袋采集法是目前最佳的方法。新生儿娩出后，在距脐2~3cm处结扎脐带并剪短，从胎盘端粗静脉穿刺，脐带血借宫缩力及负压流入采血袋，血袋内装有无菌抗凝剂，平均采集脐血112ml。
2、分离纯化
（1）
脐血干细胞的分离方法有几种：3%明胶沉淀法、氯化钠破坏红细胞法、Ficoll和Percoll分离法、6%羟乙基淀粉沉淀法及甲基纤维素沉淀法。6%羟乙基淀粉沉淀法是目前最常用的脐血分离方法。
（2）目前主要有三种纯化CD34+的方法：
①MACS：单克隆抗体免疫磁珠分离系统（MACS）；
②细胞于鼠抗人单克隆CD34lgG1抗体结合：孵育30min后，再与羊抗鼠IgG1免疫磁珠结合，孵育30min后，细胞于磁珠混合物置于磁场中，加压洗脱，去除非黏附细胞，收集CD34+细胞；
③免疫荧光法：流式细胞仪免疫荧光法检测，其纯度可达95%~98%。
（3）保存
采集的脐带血可以全血保存，但因为涉及保存的空间及解冻后溶血问题，一般讲分离后的造血干细胞，加入冷冻保护剂（DMSO）后放在冷冻液中保存。经典的保存方式：
①液氮低温保存：应用10%的DMSO作为冷冻保护剂，程序降温至-80℃，再入液氮中深低温保存（-1960℃）；
②直接置冰箱保存：采用5%DMSO+6%HES作冷冻保护剂，将脐带血直接置于-1350~-700℃冰箱冷冻保存。
