常言道：眼睛是心灵的窗户，一旦眼睛出现问题，等于是关上了心灵之窗。而提起眼部疾病，想必大家第一时间想到的便是角膜病，这是一种十分常见的眼部疾病，同时也是导致眼睛失明的主要原因。为了能够让患者重获光明，科学家们将希望寄托在干细胞上。

　　再生医学网获悉，近日，来自美国哈佛大学医学院的研究人员开发了体外扩增培养LSC后再进行移植的CLET疗法并取得了一定的长期疗效。相关研究成果发表在Science Advances期刊上。

　　干细胞恢复眼部视力

　　在角膜的解剖结构中，角膜上皮干细胞（LESC）的存在保证了角膜上皮的快速稳定更新，而一旦这些细胞缺乏时，就会导致角膜缘干细胞缺乏症（LSCD）。LSCD的常见症状包括持续性的角膜上皮缺损、炎症和角膜疤痕，严重者可造成视力障碍甚至失明。

　　不过，令人感到遗憾的是，传统的眼角膜移植疗法无法治疗LSCD，新开发的自体或异体角膜缘移植物替代疗法则具有较高的免疫排斥风险和诱发供体眼发生LSCD的风险。

　　为了解决上述问题，研究人员开发了体外扩增培养LSC后再进行移植的CLET疗法并取得了一定的长期疗效。但是由于其在生产过程中使用了鼠源的饲养层细胞和胎牛血清，容易产生额外的生物安全问题。因此本项研究就在原有基础上创新性地开发了无异生素、无血清和无抗生素的培养方法并体外制备了CALEC。同时，1期临床试验5名患者中的4名在接种12个月后获得了稳定的眼表面功能，表明了该方法的有效性。

　　在这项研究中，研究人员开发了新的方法在体外通过人羊膜来培养自体角膜上皮细胞（CALEC），避免了使用抗生素和小鼠饲养层细胞。

　　为了保证一期临床移植手术的顺利实施，研究人员进一步探究了从实验室到手术室的最佳储存运输条件。在完成了前期临床前开发过程后，研究人员在5名患者身上进行了1期临床试验，以检测CALEC移植物用于单侧LSCD的安全性和可行性和初步疗效。

　　在1期临床测试中，供体眼睛均痊愈，没有并发症，视力在4周内恢复到基线水平，并未发生重大安全事件。

　　在1期临床试验中，研究人员统计的CALEC移植物总培养时间为13.0至22.0天。P0培养物的平均存活率为78.7±4.2%。流式细胞术结果表明了P0期细胞培养结束时均表达上皮细胞表型。但是，在5名患者中，有2名患者治疗失败，其余3名患者的CALEC移植物免疫荧光分析显示Krt12、p63、p63α和C/EBPδ的平均阳性率分别为2.9%、2.8%、4.3%和2.7%。

　　目前，临床上针对角膜病的治疗主要以同种异体角膜移植和人工替代物移植为主，但前者供需失衡，后者则具有较高的免疫排斥风险。对此，再生医学网表示，随着该项研究成果的问世，或将彻底改写角膜病治疗史，从而让更多患者能够避免失明或重获光明。